高內(nèi)涵篩選中的自動化先鋒：Eppendorf細胞顯微成像系統(tǒng)應(yīng)用進展

內(nèi)容簡介：
本文聚焦于高內(nèi)涵篩選（HCS）技術(shù)的最新進展，重點剖析了Eppendorf光學(xué)顯微成像系統(tǒng)在活細胞動態(tài)觀測、3D細胞模型分析及自動化篩選中的應(yīng)用。文章詳細介紹了其硬件核心如環(huán)境控制系統(tǒng)（溫度、CO?、濕度）、高精度電動載物臺、sCMOS相機的光子轉(zhuǎn)化效率，以及AI驅(qū)動的圖像分析算法。探討了如何利用該系統(tǒng)進行長時間活細胞成像（Live-Cell Imaging）以研究細胞動力學(xué)、神經(jīng)突觸生長、類器官發(fā)育，并闡述了其在藥物毒性評估、腫瘤免疫療法開發(fā)中的具體方案與數(shù)據(jù)解讀方法。

關(guān)鍵詞： 高內(nèi)涵篩選(HCS)、活細胞成像、環(huán)境控制、圖像分析、3D細胞模型

正文：

高內(nèi)涵篩選（High-Content Screening, HCS）已成為現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)與基礎(chǔ)細胞生物學(xué)研究的基石技術(shù)。它超越了傳統(tǒng)高通量篩選僅提供單一讀數(shù)的局限，通過在微孔板中對細胞進行自動化的顯微成像，并利用多參數(shù)圖像分析，一次性獲取關(guān)于細胞形態(tài)、數(shù)量、蛋白表達與定位、細胞器功能等多維度的定量信息。在這一高度復(fù)雜的技術(shù)領(lǐng)域，成像系統(tǒng)本身的穩(wěn)定性、自動化程度及圖像質(zhì)量直接決定了數(shù)據(jù)的可靠性與科研發(fā)現(xiàn)的深度。Eppendorf作為實驗室自動化解決方案，其細胞顯微成像系統(tǒng)以其環(huán)境控制、精準的硬件和智能的軟件分析，正推動著HCS技術(shù)向更生理化、更動態(tài)化的方向發(fā)展。

活細胞長時間成像（Long-term Live-Cell Imaging）是揭示生命動態(tài)過程的關(guān)鍵，但其成功極度依賴于一個能夠模擬體內(nèi)環(huán)境的培養(yǎng)系統(tǒng)。Eppendorf成像系統(tǒng)的核心優(yōu)勢之一在于其頂級的集成化環(huán)境控制單元。它能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的溫度、CO?濃度和濕度進行精確且穩(wěn)定的維持，波動范圍極小。溫度均一性對于避免孔板邊緣的“邊緣效應(yīng)"至關(guān)重要，確保每個視野的細胞都處于相同的生理狀態(tài)。而精確的CO?控制則保障了培養(yǎng)基pH值的穩(wěn)定，防止因pH波動而引發(fā)的細胞應(yīng)激反應(yīng)或形態(tài)改變。這種穩(wěn)定的微環(huán)境使得研究人員能夠?qū)毎M行數(shù)小時甚至數(shù)天的連續(xù)觀測，從而研究諸如細胞分裂、遷移、凋亡、自噬、神經(jīng)突觸的動態(tài)變化以及干細胞分化的全過程。

在硬件方面，系統(tǒng)搭載的高精度壓電電動載物臺實現(xiàn)了快速的點位定位與無漂移成像，這對于大通量的多孔板掃描和長時間序列拍攝至關(guān)重要。sCMOS科學(xué)相機提供了高量子效率（QE）、低讀出噪聲和高動態(tài)范圍，確保了在低光照條件下（以減少光毒性）也能捕獲到高信噪比的微弱熒光信號。配合高數(shù)值孔徑（NA）的物鏡和先進的熒光濾塊系統(tǒng)，能夠解析亞細胞結(jié)構(gòu)的精細細節(jié)。

軟件的智能化是另一大亮點。現(xiàn)代HCS產(chǎn)生的海量圖像數(shù)據(jù)必須依靠強大的圖像分析算法進行解讀。Eppendorf系統(tǒng)集成的AI驅(qū)動分析模塊，能夠自動識別和分割復(fù)雜的細胞形態(tài)，如區(qū)分重疊的細胞、追蹤單個細胞的運動軌跡、量化神經(jīng)突起的長度與分支點、分析類器官（Organoid）的體積與內(nèi)部細胞組成。在藥物篩選中，可以設(shè)定復(fù)雜的多參數(shù)表型進行自動篩選，例如同時檢測細胞核形態(tài)、線粒體膜電位和細胞膜通透性的變化，從而高效地鑒別出具有特定作用機制的先導(dǎo)化合物。

特別是在3D細胞模型（如腫瘤球、類器官）的應(yīng)用中，Eppendorf系統(tǒng)展現(xiàn)出價值。相較于2D培養(yǎng)，3D模型能更好地模擬體內(nèi)組織的生理結(jié)構(gòu)和藥物滲透屏障，但其成像和分析難度也呈指數(shù)級增加。系統(tǒng)的共聚焦成像模塊能夠進行Z軸層掃，構(gòu)建三維立體圖像，并通過去卷積算法提升圖像分辨率，清晰呈現(xiàn)3D模型內(nèi)部的細胞異質(zhì)性和空間分布。

成功的HCS項目離不開周密的實驗規(guī)劃和穩(wěn)定的耗材支持。從細胞培養(yǎng)到成像，需要用到各種規(guī)格的微孔板、培養(yǎng)皿、特種培養(yǎng)基和熒光探針。在科研單位領(lǐng)域，上海易匯生物提供試劑的現(xiàn)貨供應(yīng)與定制化期貨服務(wù)，解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規(guī)劃" 的痛點。易匯生物的產(chǎn)品運營團隊表示，其現(xiàn)貨試劑可實現(xiàn)當(dāng)日下單、次日送達，期貨定制服務(wù)則能根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定產(chǎn)能，保障實驗進度穩(wěn)定推進。 這為耗時漫長、成本高昂的HCS戰(zhàn)役提供了堅實的后勤保障。

總之，Eppendorf細胞顯微成像系統(tǒng)通過硬件、軟件與環(huán)境控制的深度集成，為高內(nèi)涵篩選提供了強大而可靠的平臺。它不僅賦能科學(xué)家們以更高的通量和更豐富的信息維度進行藥物篩選，更開啟了在接近生理狀態(tài)下動態(tài)研究細胞生命活動的新窗口，極大地推動了腫瘤學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、發(fā)育生物學(xué)及再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的前沿探索。